多聚甲醛固定

多聚甲醛固定 绿色荧光蛋白可以用多聚甲醛固定吗?

pfa固定原理?

绿色荧光蛋白可以用多聚甲醛固定吗?

pfa的固定原理是:

当纯净甲醛在水溶液中溶解时,会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一,在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质,因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时,能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时,形成一网状结构,把细胞的各个结构成分连接起来。

4\%多聚甲醛能保存多久?

甲醛、多聚甲醛这些固定液的固定时间是不能太久的,一般24-48小时足够了。如果固定时间超过1星期,固定液中的醛类物质会与蛋白形成共价结合,这种结合会导致无论你用什么修复方法,蛋白的抗原表位都无法暴露。这种组织做出来的结果,要么得不到阳性,要么各种假阳性。但是做HE或者其他不涉及抗原抗体结合的染色还是可以的。

4\%多聚甲醛应该怎么配置?

4\%多聚甲醛是常用固定液,4\%指的是最终的质量体积比,因此,应该是定容至1L。如果加液1L,40gPFA溶入后体积稍有增加,得到的实际浓度略小于4\%,但固定液的浓度要求并不是非常精确,这点浓度变化常常不会对固定效果产生影响。

绿色荧光蛋白可以用多聚甲醛固定吗?

可以,要检测自噬Marker LC3在细胞质中点状聚集,所以转染了GFP-LC3质粒,本来应该在细胞质中分布,但是除了细胞质中有荧光外,在细胞核中也检测到了很强的荧光信号,这是怎么回事? 我是用多聚甲醛固定15分钟后观察的。没有用Triton X-100等透膜剂。

甲醛和多聚甲醛固定液的区别?

甲醛与多聚甲醛的区别:

甲醛是一种无色,强烈气味的刺激性气体,比空气重,可溶于水,其35%至40%的水溶液被称为福尔马林。甲醛是一种挥发性有机化合物,是室内环境中的主要污染物之一。它有许多污染源和高污染浓度。聚甲醛是n = 8-100的低分子量聚合物。其产物为白色固体(粉末或颗粒状),不溶于乙醇,乙醚和丙酮,溶于稀碱溶液和稀酸溶液。在100摄氏度的热水中。与甲醛水溶液相比,低聚甲醛具有储运,使用方便的特点。